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基因工程中目的基因反链接-基因工程中目的基因反接影响

简述信息一览:

基因工程中的一些问题

美国的孟山都公司(孟山都是最大的一个,他的资本渗透到许多转基因食品公司)他们的一份未公开的研究报告显示,转基因玉米可引起大鼠肾脏发育不良,免疫力下降等。

第一个问题:生物工程中检测的目的是为了确认目的基因确实是按照设计好的方案插入了。

基因工程中目的基因反链接-基因工程中目的基因反接影响
(图片来源网络,侵删)

引物之间的互补配对造成PCR反应时,引物之间互相退火结合,失去和模板结合的能力,从而使聚合酶无法起始聚合反应,所以失效了。

在基因工程中,将目的基因与载体DNA连接的酶是()

1、在构建基因表达载体时要用到的工具酶有限制酶和DNA连接酶。基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。

2、转基因技术 中对细菌的环状 质粒 以及 目的基因 进行切割的一种,在使用时应注意用同种限制酶切割才会产生相同的 粘性末端 ,一种限制酶只能识别一种序列排列方式,大部分都是 回文序列 ,像CCGG之类的比较多。

基因工程中目的基因反链接-基因工程中目的基因反接影响
(图片来源网络,侵删)

3、限制性内切酶可以将目的基因两侧及运载体上切出黏性末端,然后可以在DNA连接酶作用下将目的基因与运载体连接在一起。

4、DNA连接酶:连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键,将DNA片段再连接起来的针线。运载体:将体外重组好的DNA片段导入受体细胞,常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。考点:基因工程的工具。

人工合成目的基因的办法?

目前人工合成基因的方法主要有两条。一条途径是以目的基因转录成的信使rna为模版,反转录成互补的单链dna,然后在酶的作用下合成双链dna,从而获得所需要的基因。

以mRNA为模板,用反转录酶合成cDNA。再以cDNA为模板进行PCR扩增DNA。这里,关键是要预先获得目的基因的mRNA,mRNA极易降解,所以提取过程中要防止内源和外源RNase对其降解。

整个合成步骤共分为4步骤:脱保护-偶联-加帽-氧化。合成过程中需要使用的合成原料有:(1)4种合成单体:AGCU;(2)合成试剂:脱保护剂、活化剂、盖帽剂、氧化剂以及符合质量的乙腈等;(3)合成载体,如CPG。

获取目的基因的方法主要有两种:从供体细胞的DNA中直接分离基因,最常用的方法是“鸟枪法”又叫“散弹射击法。

以目的基因转录成的mRNA为模板反转录合成的双链cDNA片段,其编码区是连续的,没有内含子(成熟mRNA中的序列都是由真核细胞基因的编码区的外显子部分转录来的)。

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