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ms蛋白质-msd蛋白

简述信息一览:

高通量鉴定蛋白质的主要技术是什么?

盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。

蛋白质芯片检测是一种高通量的蛋白功能分析技术,可用于蛋白质表达谱分析,研究蛋白质与蛋白质的相互作用,DNA-蛋白质、RNA-蛋白质的相互作用等,可以通过蛋白质芯片检测技术对于疾病在体内的发生、发展、疾病种类、治疗效果等进行观察监测……总的来说,蛋白质芯片技术检测能同时检测人体内上百种蛋白质。

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(图片来源网络,侵删)

双缩脲法是一个用于鉴定蛋白质的分析方法。双缩脲试剂是一个碱性的含铜试液,呈蓝色,由1%氢氧化钾、几滴1%硫酸铜和酒石酸钾钠配制。当底物中含有肽键时(多肽),试液中的铜与多肽配位,配合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。

蛋白质组学的重要性在于它能解答关于疾病的关键问题,如蛋白质表达的差异、定量分析、定位研究以及翻译后修饰和相互作用(蛋白质组学解锁健康与疾病的密码)。

关于蛋白质及氨基酸的显色反应中的***反应

蛋白质与茚三酮反应生成紫色物质。氨基酸与茚三酮反应生成紫色物质。氨基酸与Sanger试剂反应后经酸水解生成***物质。酪氨酸与重氮化合物反应生成橘***物质。组氨酸与重氮苯磺酸反应生成棕红色物质。

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(图片来源网络,侵删)

是茚三酮颜色反应。除脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮作用生成***物质外,所有α-氨基酸与茚三酮发生反应生成紫红色物质,最终形成蓝紫色化合物。1︰1500000浓度的氨基酸水溶液即能发生反应而显色。

茚三酮反应:蛋白质或氨基酸的游离氨基与茚三酮在弱酸条件下发生反应,生成蓝紫色化合物,但脯氨酸与茚三酮反应则是生成***化合物。***反应:含有苯环的蛋白质可以与浓硝酸发生显色反应,生成***化合物。考马斯亮蓝反应:考马斯亮蓝在游离状态下呈红色,而与蛋白质通过疏水作用结合后呈蓝色。

蛋白类物质可否用GC-MS检测

进行GC-MS分析的样品应是有机溶液,水溶液中的有机物一般不能测定,须进行萃取分离变为有机溶液,或***用顶空进样技术。有些化合物极性太强,在加热过程中易分解,例如有机酸类化合物,此时可以进行酯化处理,将酸变为酯再进行GC-MS分析,由分析结果可以推测酸的结构。

概念不同:GC-MS是气相色谱和质谱联用,GC分离,MS检测;LC-MS是液质联用,LC是分离,MS是检测;精密度不同:LC-MS-MS是液相色谱-串联质谱,比LC-MS更精密一些;物质不同:HPLC又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”,是可以分离和检测溶解在溶液中的微量物质。

质谱分析法对样品有一定的要求。进行GC-MS分析的样品应是有机溶液,水溶液中的有机物一般不能测定,须进行萃取分离变为有机溶液,或***用顶空进样技术。有些化合物极性太强,在加热过程中易分解,例如有机酸类化合物,此时可以进行酯化处理,将酸变为酯再进行GC-MS分析,由分析结果可以推测酸的结构。

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