基因工程中目的基因检测-基因工程中的检测方法
简述信息一览：
检测目的基因是否表达的方法是
最直接的就是检测目的蛋白，一般都是用western blot；如果是分泌蛋白，可以做ELISA；如果蛋白有特殊的功能（比如GFP，绿色荧光蛋白），也可以直接检测其功能（比如看有无绿色荧光）。
检测分三种，首先是通过对标记基因的检测，通常用DNA分子杂交技术，来检验标记基因（目的基因）是否成功的导入受体细胞。再用DNA分子杂交技术，来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。
反转录法：培养目的基因所在生物细胞一定的时间。用试剂盒或者传统的Trizol法获取mRNA。配置RT-PCR反应体系，反转录生成cDNA。使用目的基因涉及的引物对cDNA进行PCR反应。同时设置对照组使用持家基因的引物PCR。
基因工程第四步中包括导入检测，转录检测和翻译检测，方法分别是DNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术。
Northernblot（诺瑟杂交）。Northernblot（诺瑟杂交）是一种通过检测RNA的表达水平来检测基因表达的方法。首先通过电泳的方法将不同的RNA分子依据分子的大小加以区分，然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段。
关于目的基因的检测问题(DNA分子杂交技术)
1、检测分三种，首先是通过对标记基因的检测，通常用DNA分子杂交技术，来检验标记基因（目的基因）是否成功的导入受体细胞。再用DNA分子杂交技术，来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。
2、是否转录可以检测细胞内有无相应的RNA，用的技术叫分子杂交技术。如果检测目的基因是否成功插入，用的是DNA分子杂交技术。原理其实是一样的。检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功转录的方法都是分子杂交技术 不是的。
3、假如将重组质粒导入受体细胞中，目的基因并没有整合到受体细胞染色体DNA上，当然就得不到杂交带了。方法是：用同位素标记的目的基因的单链做探针与可能插入目的基因的染色体dna杂交，洗去未结合的探针，结合的不被洗去。
4、标记基因是检查目的基因是否整合到表达载体上。分子杂交是检查目的基因是否导入受体细胞。
5、是否转录可以检测细胞内有无相应的RNA，用的技术叫分子杂交技术。如果检测目的基因是否成功插入，用的是DNA分子杂交技术。原理其实是一样的。
基因工程目的基因的检测
目的基因导入受体，说起来简单。但实际的过程并不是我们宏观上放取物品那么简单。先把整个过程考虑完你再考虑你的方案是否成立。
剪刀：限制酶。针线：DNA连接酶。运输：运载体。基因工程四个步骤：目的基因的获取。基因表达载体的构建（目的基因与运载体结合）。将目的基因导入受体细胞。目的基因的检测与表达。
目的基因的检测和表达 目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。 以上步骤完成后，在全部的受体细胞中，真正能够摄入重组DNA分子的受体细胞是很少的。
基因工程一般包括四个步骤，也即技术路线：一是取得符合人们要求的dn***段，这种dn***段被称为“目的基因”；二是构建基因的表达载体；三是将目的基因导入受体细胞；四是目的基因的检测与鉴定。
其实这个并不难理解，就是关于用三种探针去分别检测是否有目的DNA、mRNA，蛋白质的存在问题，能杂交，有杂交带就说明有以上物质的存在。
目的基因能否稳定遗传的关键是检测什么
1、目的基因的检测和表达。目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。
2、还可用于诊断苯丙酮尿症等。染色体分析：染色体分析直接检测染色体数目及结构的异常，而不是检查某条染色体上某个基因的突变或异常。通常用来诊断胎儿的异常。
3、检测分三种，首先是通过对标记基因的检测，通常用DNA分子杂交技术，来检验标记基因（目的基因）是否成功的导入受体细胞。再用DNA分子杂交技术，来看目的基因导入后是否成功转录出信使RNA。
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