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蛋白质邻近标记-标记蛋白质n端的试剂

文章阐述了关于蛋白质邻近标记,以及标记蛋白质n端的试剂的信息,欢迎批评指正。

简述信息一览:

蛋白质标记有几种类型?

1、对蛋白质结构进行分类的方法有多种。按蛋白质的结构层次分,有四种。一级结构:组成蛋白质多肽链的线性氨基酸序列。二级结构:依靠不同氨基酸之间的C=O和N-H基团间的氢键形成的稳定结构,主要为α螺旋和β折叠。

2、蛋白质标记主要是指同工酶、等位酶、贮藏蛋白等等,本文主要介绍DNA标记。理想的分子标记应具有以下几个条件:①以孟德尔方式遗传。②多态性好,自然条件下存在许多变异位点。③遍布整个基因组,能够检测到整个基因组的变异。

蛋白质邻近标记-标记蛋白质n端的试剂
(图片来源网络,侵删)

3、年,Engvall Van Weemen等报道了酶联免疫吸附试验,从而建立了酶标抗体的定量检测技术。20世纪80年代,基于酶标记抗体检测和鉴定蛋白质分子的免疫转印技术问世。

4、可以使用特定的抗体进行Western blot分析,以比较这些蛋白质在7种细胞中的表达水平。

在蛋白质哪个部位标记35S,肽键还是R基团

噬菌体在侵染细菌时,只将其DNA注入细菌细胞内,而蛋白质外壳留在细胞外。离心后,沉淀物是被侵染的细菌,上清液含未进入细菌细胞内的蛋白质外壳。所以,32P标记,放射性主要在沉淀中;而35S标记,放射性主要在上清液中。

蛋白质邻近标记-标记蛋白质n端的试剂
(图片来源网络,侵删)

氨基酸借肽键联结成多肽链,是蛋白质分子中的主要共价键,性质比较稳定。

在体内有许多蛋白质分子含有二条或多条肽链,每一条多肽链都有其完整的***结构,称为蛋白质的亚基,亚基与亚基之间呈特定的三维空间排布,并以非共价键相连接。

而非极性的基团则被埋在分子内部,不与水接触。蛋白质分子中侧链R基团的相互作用对稳定球状蛋白质的***结构起着重要作用。蛋白质的四级结构指数条具有独立的***结构的多肽链通过非共价键相互连接而成的聚合体结构。

蛋白质为什么用S35标记?

因为S大部分存在于蛋白质中,而P大部分存在于DNA中,所以选择35S和32P分别对蛋白质与DNA进行标记。如果用其他元素进行标记则不具特异性,如C、H、O均存在于蛋白质和DNA中。

用35S标记,是因为蛋白质一般都具有半胱氨酸和甲硫氨酸,这两种氨基酸中含有硫元素。

这是为了做到特异性标记,蛋白质含S而DNA没有,DNA含有P而蛋白质没有。

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